一、BD流式細(xì)胞儀的檢測(cè)范圍
1.流式細(xì)胞儀可以檢測(cè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)敢於挑戰,包括:細(xì)胞大小便利性、細(xì)胞粒度、細(xì)胞表面面積機遇與挑戰、核漿比例、DNA含量與細(xì)胞周期、R NA 含量、蛋白質(zhì)含量取得明顯成效。
2.流式細(xì)胞儀可以檢測(cè)細(xì)胞功能,包括:細(xì)胞表面/ 胞漿/ 核的特異性抗原數據、細(xì)胞活性創新的技術、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子、酶活性改進措施、激素結(jié)合位點(diǎn)和細(xì)胞受體就此掀開。
二、BD流式細(xì)胞儀的臨床應(yīng)用
1.流式細(xì)胞術(shù)在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用:流式細(xì)胞術(shù)可以檢測(cè)腫瘤細(xì)胞增殖周期今年、檢測(cè)腫瘤細(xì)胞表面標(biāo)記、癌基因表達(dá)產(chǎn)物結構不合理、進(jìn)行多藥耐藥性分析動手能力、檢測(cè)凋亡;2.流式細(xì)胞術(shù)在血液學(xué)中的應(yīng)用:檢測(cè)白血病和淋巴瘤細(xì)胞、活化血小板意見征詢、造血干細(xì)胞(CD34+)計(jì)數(shù)提升、白血病與淋巴瘤的免疫分型、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的必然要求、細(xì)胞移植的交叉配型和免疫狀態(tài)監(jiān)測(cè);3.流式細(xì)胞術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用:可以進(jìn)行淋巴細(xì)胞及其亞群分析研究成果、淋巴細(xì)胞免疫分型、檢測(cè)細(xì)胞因子完善好。
三體驗區、BD流式細(xì)胞儀的科研應(yīng)用
主要有細(xì)胞動(dòng)力學(xué)功能研究、環(huán)境微生物分析活動上、流式細(xì)胞術(shù)與分子生物學(xué)研究有望。
四、流式細(xì)胞術(shù)常規(guī)檢測(cè)時(shí)的樣品制備
(一) 直接免疫熒光標(biāo)記法
取一定量細(xì)胞(約1 × 106 細(xì)胞/ml )導向作用,直接加入連接有熒光素的抗體進(jìn)行免疫標(biāo)記反應(yīng)(如做雙標(biāo)或多標(biāo)染色方案,可把幾種標(biāo)記有不同熒光素的抗體同時(shí)加入),孵育20-60分鐘后十大行動,用PBS(pH7.2 - 7.4)洗1-2 次左右,加入緩沖液重懸,上機(jī)檢測(cè)綜合措施。本方法操作簡(jiǎn)便可靠保障,結(jié)果準(zhǔn)確,易于分析建言直達,適用于同一細(xì)胞群多參數(shù)同時(shí)測(cè)定多種。雖然直標(biāo)抗體試劑成本較高將進一步,但減少了間接標(biāo)記法中較強(qiáng)的非特異熒光的干擾,因此更適用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)發展成就。
(二) 間接免疫熒光標(biāo)記法
取一定量的細(xì)胞懸液(約1X106 細(xì)胞/ml )成就,先加入特異的*抗體,待反應(yīng)*后洗去未結(jié)合抗體開展面對面,再加入熒光標(biāo)記的第二抗體系統,生成抗原-抗體-抗抗體復(fù)合物,以FCM檢測(cè)其上標(biāo)記的熒光素被激發(fā)后發(fā)出的熒光進一步提升。本方法費(fèi)用較低空間廣闊,二抗應(yīng)用廣泛,多用于科研標(biāo)本的檢測(cè)改革創新。但由于二抗一般為多克隆抗體知識和技能,特異性較差,非特異性熒光背景較強(qiáng)新模式,易影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果實現。所以標(biāo)本制備時(shí)應(yīng)加入陰性或陽(yáng)性對(duì)照。
另外組織了,由于間標(biāo)法步驟較多服務體系,增加了細(xì)胞的丟失,不適用測(cè)定細(xì)胞數(shù)較少的標(biāo)本紮實。