一行業內卷、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及設(shè)備
(一) 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置
組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與其他一般實(shí)驗(yàn)室工作的主要區(qū)別在于要求保持無(wú)菌操作全面協議,避免微生物及其他有害因素的影響.目前,超凈工作臺(tái)的廣泛使用的積極性,很大程度上方便了組織細(xì)胞培養(yǎng)工作,并使一些常規(guī)實(shí)驗(yàn)室有可能用于進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng).
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)能進(jìn)行六方面的工作:無(wú)菌操作將進一步、孵育更加廣闊、制備關規定、清洗重要的作用、消毒滅菌處理、儲(chǔ)藏解決方案。
1.無(wú)菌操作區(qū)
瀯?。?)無(wú)菌操作室:無(wú)菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無(wú)菌操作的區(qū)域,最好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾增產。
理想的無(wú)菌操作室應(yīng)劃為三部分:
a)更衣室—―供更換衣服便利性、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b)緩沖間—―位于更衣間與操作間之間行動力,目的是為了保證操作間的無(wú)菌環(huán)境,同時(shí)可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器提供有力支撐。
c)無(wú)菌操作間—―專(zhuān)用于無(wú)菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)統籌。其大小要適當(dāng)最深厚的底氣,且其頂部不宜過(guò)高(不超過(guò)2.5m)以保證紫外線的有效滅菌效果;墻壁光滑*以便清潔和消毒.工作臺(tái)安置不應(yīng)靠墻壁振奮起來,臺(tái)面要光滑壓塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察利用好。
無(wú)菌操作間的空氣消毒:
紫外線燈—-產(chǎn)生臭氧深入各系統,并且室內(nèi)溫度及濕度均較高,不利于工作人員健康系列。
空氣過(guò)濾的恒溫恒濕裝置—-最好作用。
表1潔凈室(區(qū))空氣潔凈度級(jí)別表
潔凈度級(jí)別塵粒最大允許數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)浮游菌/立方米沉降菌/皿
100級(jí)3相互配合,500051
10000級(jí)350,0002著力增加,0001003
100000級(jí)3,500智能化,00020,00050010
300000級(jí)10,350,00060,000-15
無(wú)臭氧紫外線消毒器
電子消毒滅菌器—-在高壓電場(chǎng)作用下,電子管的內(nèi)外電極發(fā)生強(qiáng)烈電子轟擊處理,使空氣電離而將空氣中的氧轉(zhuǎn)換成臭氧建設。臭氧是一種強(qiáng)氧化劑,能同細(xì)菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進(jìn)行氧化分解反應(yīng)助力各行,從而靠臭氧氣體彌漫性擴(kuò)散達(dá)到殺菌之目的前來體驗,消毒時(shí)沒(méi)有死角。消毒后空間的殘留臭氧只需30~40min即能自行還原成氧氣,空氣不留異味確定性,消毒物體表面不留殘毒更加廣闊。
(2)凈化工作臺(tái):操作簡(jiǎn)單講故事,安裝方便非常完善,占用空間小且凈化效果很好。一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種:a)側(cè)流式或稱(chēng)垂直式b)外流式或稱(chēng)水平層流式面向。
凈化工作臺(tái)工作原理(大致相同)--通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾支撐作用,由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱,再經(jīng)高效空氣過(guò)濾器精濾效率,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區(qū)規模,從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。
側(cè)流式工作臺(tái)—-空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過(guò)工作臺(tái)面流向?qū)?cè)講道理,也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè)發展目標奮鬥,形成氣流屏障保持工作區(qū)無(wú)菌。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為封閉式更多的合作機會。
外流式(水平式)工作臺(tái)—-凈化后的空氣面向操作者流動(dòng)延伸,因而外方氣流不致混入操作,但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作則對(duì)操作者不利服務好。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為開(kāi)放式(已少用)新趨勢。
凈化工作臺(tái)應(yīng)用注意:
(1)凈化工作臺(tái)應(yīng)安裝在隔離好的無(wú)菌間或清潔無(wú)塵的房間內(nèi),以免塵土過(guò)多易使過(guò)濾器阻塞,降低凈化效果共謀發展,縮短其使用壽命學習。
(2)新安裝的或長(zhǎng)期未使用的工作臺(tái)聽得懂,工作前必須對(duì)工作臺(tái)和周?chē)h(huán)境用真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的工具進(jìn)行清潔工作,然后再采用藥物滅菌法或紫外線滅菌進(jìn)行滅菌處理應用優勢。
(3)使用凈化工作臺(tái)前,應(yīng)先用75%酒精擦洗臺(tái)面高效節能,并提前以紫外線滅菌燈照射30~50min處理凈化工作區(qū)內(nèi)積存的微生物.關(guān)閉滅菌燈后應(yīng)啟動(dòng)風(fēng)機(jī)使之運(yùn)轉(zhuǎn)兩分鐘后再進(jìn)行培養(yǎng)操作影響力範圍。
(4)凈化工作區(qū)內(nèi)不應(yīng)存放不必要的物品新創新即將到來,以保持潔凈氣流流型不受干擾邁出了重要的一步。
(5)注意凈化區(qū)內(nèi)氣流的變化,一旦感到氣流變?nèi)踉O施,如酒精燈火焰不?dòng)需求,加大電機(jī)電壓仍未見(jiàn)情況改變則說(shuō)明濾器已被阻塞,應(yīng)及時(shí)更換規模設備。一般情況下真諦所在,高效過(guò)濾器三年更換一次。更換高過(guò)濾器應(yīng)請(qǐng)專(zhuān)業(yè)人員操作競爭力,以保持密封良好充分。粗過(guò)濾器中的過(guò)濾布(無(wú)紡布)應(yīng)定期清洗更換,時(shí)間應(yīng)根據(jù)工作環(huán)境潔凈程度而定廣泛應用,通常間隔3—6個(gè)月進(jìn)行一次關註度。
(6)凈化工作臺(tái)使用完畢應(yīng)及時(shí)清理工作臺(tái)面上的物品并用酒精擦洗臺(tái)面使之始終保持潔凈哪些領域。
「异短魬?。?)凈化工作臺(tái)應(yīng)定期進(jìn)行功能測(cè)試,檢查凈化工作臺(tái)各項(xiàng)工作指標(biāo)是否達(dá)到要求,例如進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)建立和完善,定期檢查臺(tái)面空氣的潔凈度是否達(dá)標(biāo).
超凈工作臺(tái)的無(wú)菌程度檢查超凈工作臺(tái)在消毒處理后提供了遵循,無(wú)菌試驗(yàn)前及操作過(guò)程中需檢查空氣中菌落數(shù);取直徑約90mm平皿大型,在超凈工作臺(tái)內(nèi)點(diǎn)燃酒精燈服務效率,在酒精燈旁,以無(wú)菌操作重要意義,將平皿半開(kāi)注入溶化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約20ml統籌發展,制成平板,在30~35℃預(yù)培養(yǎng)48小時(shí)體系,證明無(wú)菌后將平板3個(gè)生產製造,以無(wú)菌方式帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)左、中攜手共進、右各放一個(gè);打開(kāi)平皿蓋扣置,平板在空氣中暴露30分鐘后將平皿蓋蓋好共同,置30~35℃培養(yǎng)48小時(shí),取出檢查經過,100級(jí)清潔度要求:3個(gè)平皿上生長(zhǎng)的菌落數(shù)平均不得超過(guò)1個(gè).
超凈工作臺(tái)應(yīng)定期請(qǐng)有關(guān)部門(mén)檢查其潔凈度強大的功能,應(yīng)達(dá)到100級(jí)(一般用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀)檢測(cè)塵埃粒徑≤5祄的粒數(shù)不得超過(guò)3。5個(gè)/升解決方案;空氣流量應(yīng)控制在0.75~1.0m3/s;細(xì)菌菌落數(shù)平均<1個(gè)優勢,可根據(jù)無(wú)菌狀況必要時(shí)置換過(guò)濾器。
2.孵育區(qū)
本區(qū)對(duì)無(wú)菌的要求雖不比無(wú)菌區(qū)嚴(yán)格增產,但仍需清潔無(wú)塵便利性,因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來(lái)往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行行動力,后者費(fèi)用高提供有力支撐,一般實(shí)驗(yàn)室多采用孵箱進(jìn)行工作.
3.制備區(qū)
在該區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。
4.儲(chǔ)藏區(qū)
主要存放各類(lèi)冰箱保供、干燥箱逐步顯現、液氮罐、無(wú)菌培養(yǎng)液引領、培養(yǎng)瓶等自動化裝置,此環(huán)境也需要清潔無(wú)塵.
5.清洗和消毒滅菌區(qū)
清潔和消毒滅菌區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開(kāi),主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗應用前景、準(zhǔn)備有很大提升空間、消毒及三蒸水制備等工作。
(二)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備
組織細(xì)胞培養(yǎng)室除一般實(shí)驗(yàn)室的普通常規(guī)設(shè)備外首次,尚有一些特殊需要的設(shè)備可能性更大。基本可分為兩大類(lèi):第一類(lèi)為常用的基本設(shè)備;第二類(lèi)為較高級(jí)的特殊設(shè)備.
1搖籃。常用的基本設(shè)備
〖夹g。?)儀器:
a)顯微鏡:倒置顯微鏡—-是組織細(xì)胞培養(yǎng)室所必需的日常工作常規(guī)使用設(shè)備之一,便于掌握細(xì)胞的生長(zhǎng)情況并觀察有無(wú)污染等推動。
——若有條件相對較高,尚可配置帶有照相系統(tǒng)的高質(zhì)量相差顯微鏡、解剖顯微鏡開展研究、熒光顯微鏡姿勢、錄像系統(tǒng)或縮時(shí)電影拍攝裝置等,以便隨時(shí)觀察首要任務、記錄綠色化、攝影細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
a)培養(yǎng)箱:體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣發展,需要在恒定的溫度下生存保持穩定,大多數(shù)情況下,最適溫度是37℃,溫差變化一般不應(yīng)超過(guò)±0面向。5℃支撐作用,細(xì)胞在溫度升高2℃時(shí),持續(xù)數(shù)小時(shí)即不能耐受,40℃以上將很快死亡.因此需要有能控制溫度的培養(yǎng)箱最為突出,如具有較高靈敏度的恒溫培養(yǎng)箱及CO2培養(yǎng)箱落實落細。
恒溫培養(yǎng)箱——應(yīng)選隔水式或晶體管自控溫培養(yǎng)箱,此類(lèi)培養(yǎng)箱靈敏度高高效化,溫度控制較穩(wěn)定製高點項目。一般的恒溫培養(yǎng)箱價(jià)格較便宜,其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養(yǎng)。
CO2培養(yǎng)箱—-目前多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)室已廣泛使用支撐能力。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所需要的一定量的CO2(常用濃度為5%)資源優勢,易于使培養(yǎng)液的pH保持穩(wěn)定,適用于開(kāi)放或半開(kāi)放培養(yǎng)。培養(yǎng)細(xì)胞的器皿可用培養(yǎng)皿特征更加明顯、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶估算;當(dāng)使用培養(yǎng)瓶時(shí),可將瓶蓋略微旋松,使培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)與外界保持通氣狀態(tài)的可能性。由于這種培養(yǎng)方法培養(yǎng)器皿內(nèi)部與外界相通不要畏懼,培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須保持清潔,應(yīng)定期以紫外線照射或酒精消毒措施。同時(shí)培養(yǎng)箱應(yīng)放置盛有無(wú)菌蒸餾水的水槽大大縮短,防止培養(yǎng)液蒸發(fā),使箱內(nèi)相對(duì)濕度始終保持為100%。
c)干燥箱:用于細(xì)胞培養(yǎng)箱的有些器械緊密相關、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒.干熱消毒時(shí)更默契了,電熱干燥箱升溫較高,一般需達(dá)到160℃以上培訓。通常使用鼓風(fēng)式電熱干燥箱不合理波動。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好重要工具,缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢積極拓展新的領域。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始,至100℃時(shí)更優質,停止鼓風(fēng)相對開放,應(yīng)避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長(zhǎng)脫穎而出。消毒后,不能立即打開(kāi)箱門(mén)以免驟冷而導(dǎo)致玻璃器皿損壞拓展應用,應(yīng)等候溫度自然下降至100℃以下方可開(kāi)門(mén)。
d)水純化裝置:細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)水的質(zhì)量要求較高結構,細(xì)胞培養(yǎng)以及與細(xì)胞培養(yǎng)工作相關(guān)的液體的配制用水必須事先嚴(yán)格純化處理管理。水純化時(shí)可采用離子交換裝置或蒸餾器。離子交換純水尚不能有效去除有機(jī)物能力建設,因此用水時(shí)尚需再次蒸餾模樣。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)配制各種培養(yǎng)液及試劑等均需使用三次蒸餾水:即使是用于玻璃器皿的沖洗生產體系,也應(yīng)使用二次以上蒸餾水.
目前國(guó)內(nèi)使用較多的是自動(dòng)雙重純水蒸餾器(石英管加熱),使用方便,安全很重要、蒸餾速度快(1600ml/h)技術節能。
使用注意:
○a不可采用普通自來(lái)水蒸餾,以免蒸餾器內(nèi)很快結(jié)成水垢影響蒸餾效果;同時(shí),還需視蒸餾器內(nèi)存水垢程度定期*清洗蒸餾器.
○b正確的使用方法是將經(jīng)金屬蒸餾器蒸餾的蒸餾水加入玻璃蒸餾器內(nèi)進(jìn)行再次蒸餾基石之一。
一般配制培養(yǎng)液的用水應(yīng)在配液前蒸餾聯動,不宜使用存放數(shù)日的三蒸水,以免影響培養(yǎng)用水的質(zhì)量.
目前市場(chǎng)上供應(yīng)的是含有各種級(jí)別和類(lèi)型的采用一種或多種純化方法相結(jié)合的使普通水純化為純水和超純水的純水系統(tǒng)可供選擇共同努力。例如:設(shè)計(jì)靈活的可以掛壁、也可為臺(tái)式追求卓越,也可以有儲(chǔ)水箱逐漸完善、也可直接用分液槍的純水裝置;還可根據(jù)各類(lèi)實(shí)驗(yàn)用水需求選擇配備有效殺菌或去除DNA酶合理需求、RNA酶是目前主流、蛋白酶等,甚至可有效去除掉熱源高質量、內(nèi)毒素的超濾型純水器充分發揮。
e)冰箱:細(xì)胞培養(yǎng)室必須配備
○a普通冰箱或冷藏柜
—-儲(chǔ)存培養(yǎng)液、生理鹽水管理、Hank’s液試劑等培養(yǎng)用的物品及短期保存組織標(biāo)本設計。
○b低溫冰箱(—20℃)、超低溫冰箱
—-用于儲(chǔ)存需要冷凍保存生物活性及較長(zhǎng)時(shí)期存放的制劑,如酶改進措施、血清等就此掀開。
——細(xì)胞培養(yǎng)室的冰箱應(yīng)屬專(zhuān)用,不得存放易揮發(fā)今年、易燃燒等對(duì)細(xì)胞有害的物質(zhì)穩步前行,且應(yīng)保持清潔。
f)細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器:儲(chǔ)存器常用的是液氮容器動手能力。根據(jù)使用需要分為不同的類(lèi)型及多種規(guī)格逐步改善。選擇購(gòu)置液氮容器時(shí)要綜合考慮容積大小,取放使用方便及液氮揮發(fā)量(經(jīng)濟(jì))三種因素.液氮容器的大小可自25L~500L,可以?xún)?chǔ)存1ml的安瓿250~15000個(gè)左右提升。液氮溫度可低達(dá)-196℃大大提高,使用時(shí)應(yīng)防止凍傷。由于液氮不斷揮發(fā)應用前景,應(yīng)注意觀察存留液氮情況有很大提升空間,及時(shí)定期補(bǔ)充液氮,避免揮發(fā)過(guò)多而致細(xì)胞受損首次。
目前可能性更大,國(guó)內(nèi)各類(lèi)實(shí)驗(yàn)室已廣泛使用新型的細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器進一步意見。市場(chǎng)所提供的各種新型的細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存器具有性能優(yōu)異,使用方便等特點(diǎn).例如:
——可通過(guò)*電子控制器實(shí)現(xiàn)凍存自動(dòng)化并監(jiān)測(cè)液氮水平和樣品溫度共享應用,確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點(diǎn)生產能力;
-—可配備*報(bào)警系統(tǒng),分別警報(bào)液氮液面、溫度示範推廣、電池堅持好、電壓、電源等失常情況:
——同時(shí)具備熱氣體旁路系統(tǒng),防止高于-130℃的暖空氣進(jìn)入液氮罐大幅增加,從而更有效地保護(hù)樣品,防止升溫.
另外,多種規(guī)格的*液氮運(yùn)輸特性,供應(yīng)罐系列不僅移動(dòng)方便,還可通過(guò)連接管給儲(chǔ)存罐補(bǔ)充液氮,提高工作效率等特點,保證樣品安全建言直達。
g)離心機(jī):進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),常規(guī)需要進(jìn)行制備細(xì)胞懸液將進一步、調(diào)整細(xì)胞密度充分發揮、洗滌、收集細(xì)胞等工作成就,通常需要使用離心機(jī).
○a一般可常規(guī)配置4000rpm的國(guó)產(chǎn)臺(tái)式離心機(jī)重要方式,例如細(xì)胞沉降,使用80~100g的離心機(jī)即可系統,離心力過(guò)大有時(shí)可能引起細(xì)胞的損傷非常重要。
○b另外,可根據(jù)需要添置其他類(lèi)型如大容量或可調(diào)節(jié)溫度的離心機(jī)等
○c若需特殊用途,例如某些細(xì)胞的分離制備需梯度離心提升,則需另行配置實(shí)驗(yàn)所需的具備其他特殊功能的離心機(jī)高品質。
h)天平:常用的有扭力天平、精密天平及各種電子天平支撐能力。
分析天平的感量為0資源優勢。1mg、0特征更加明顯。01mg和0.001mg估算。根據(jù)稱(chēng)取物質(zhì)的量和稱(chēng)量精度的要求,選擇適宜級(jí)別的天平的可能性。要求精密稱(chēng)定時(shí)不要畏懼,當(dāng)取樣量大于100mg選用感量為0.1mg天平,在100-10mg選用感量為0.01mg天平問題,小于10mg選用感量為0保持競爭優勢。001mg天平。
i)消毒器:直接或間接與細(xì)胞接觸的物品均需消毒滅菌處理發展機遇。
常用:○a手提式高壓蒸汽消毒器
○b目前市場(chǎng)上長效機製,具有高效法治力量、安全、方便等性能,適用于各種器皿分享、液體共享、培養(yǎng)基的高壓滅菌裝置已在流通(如脈動(dòng)真空滅菌器)》绞街??晒┦褂谜咴跍缇耐瑫r(shí)監(jiān)測(cè)滅菌容器內(nèi)的壓力和溫度生動,確保滅菌質(zhì)量和安全,并可通過(guò)記憶(儲(chǔ)存)支持系統(tǒng)改變各種參數(shù)(例如滅菌、排氣創新能力、加熱等參數(shù))新品技,即使在進(jìn)行滅菌時(shí)發(fā)生停電故障,仍可保留所設(shè)定的參數(shù)
j)濾器:目前細(xì)胞培養(yǎng)工作中采用的培養(yǎng)用液溝通機製,包括人工合成培養(yǎng)液好宣講、血清、消化用胰酶等常含有維生素領先水平、蛋白、多肽雙重提升、生長(zhǎng)因子等物質(zhì)戰略布局,這些物質(zhì)在高溫或射線照射下易發(fā)生變性或失去功能,因而上述液體多采用濾過(guò)消毒以除去細(xì)菌表現明顯更佳。
目前常使用的濾器有Zeiss濾器狀態、玻璃濾器和微孔濾器,各種濾器有其使用原理和特點(diǎn)(后詳述).
(2)培養(yǎng)用器皿:
a)培養(yǎng)器皿:供細(xì)胞接種、生長(zhǎng)等用的器皿,可由透明度好指導、無(wú)毒的中性硬質(zhì)玻璃或無(wú)毒而透明光滑的特制塑料制成廣泛認同。
(a)玻璃培養(yǎng)器皿的優(yōu)點(diǎn)是多數(shù)細(xì)胞均可生長(zhǎng)流動性,易于清洗鍛造、消毒,可反復(fù)使用,并且透明而便于觀察;缺點(diǎn)是易碎,清洗時(shí)費(fèi)人力持續創新。
(b)塑料制培養(yǎng)器皿的優(yōu)點(diǎn)是一次性使用改善,廠家已消毒滅菌密封包裝,打開(kāi)即可用于細(xì)胞培養(yǎng)操作喜愛。
常用的培養(yǎng)器皿:
培養(yǎng)瓶:由玻璃或塑料制成重要的角色。主要用于培養(yǎng)、繁殖細(xì)胞向好態勢。進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)瓶瓶口加蓋螺旋瓶蓋或膠塞平臺建設,膠塞多用于密封培養(yǎng)。國(guó)產(chǎn)培養(yǎng)瓶的規(guī)格以容量(ml)表示貢獻力量,如250ml使用、100ml大幅拓展、25ml等;進(jìn)口培養(yǎng)瓶則多以底面積(cm2)表示優化程度。
培養(yǎng)皿:由玻璃或塑料制成積極性,供盛取、分離不斷豐富、處理組織或做細(xì)胞毒性實施體系、集落形成、單細(xì)胞分離各有優勢、同位素?fù)饺胄Ч^好、?xì)胞繁殖等實(shí)驗(yàn)使用.常用的培養(yǎng)皿規(guī)格有10cm、9cm持續、6cm等多個領域、3.5cm等.
多孔培養(yǎng)板:為塑料制品‘a品和服務?晒┘?xì)胞克隆及細(xì)胞毒性等各種檢測(cè)實(shí)驗(yàn)使用應用擴展。其優(yōu)點(diǎn)是節(jié)約樣本及試劑,可同時(shí)測(cè)試大量樣本增多,易于進(jìn)行無(wú)菌操作活動上。培養(yǎng)板分為各種規(guī)格,常用的規(guī)格有:96孔進一步推進、24孔導向作用、12孔、6孔應用的選擇、4孔等十大行動。
各種單層生長(zhǎng)的細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中長(zhǎng)滿(mǎn)時(shí)可獲得的細(xì)胞數(shù),主要是取決于器皿的底表面積和細(xì)胞體積的大小。常用培養(yǎng)器皿及可獲得的細(xì)胞數(shù)(以Hela細(xì)胞為例)見(jiàn)表2.
表2常用的培養(yǎng)器皿及可獲得的細(xì)胞數(shù)
培養(yǎng)器皿底面(cm2)加培養(yǎng)液量(ml)可獲細(xì)胞量
96孔培養(yǎng)板0.320.11×105
24孔培養(yǎng)板21背景下。05×105
12孔培養(yǎng)板4綜合措施。52.01×106
6孔培養(yǎng)板9.62。52進展情況。5×106
4孔培養(yǎng)板285的積極性。07×106
3.5cm培養(yǎng)皿83.02.0×106
6cm培養(yǎng)皿215。05.2×106
9cm培養(yǎng)皿4910.012.2×106
10cm培養(yǎng)皿5510至關重要。013不久前。7×106
25cm塑料培養(yǎng)瓶255.05×106
75cm塑料培養(yǎng)瓶7515~302×107
25ml玻璃培養(yǎng)瓶194。03×106
100ml玻璃培養(yǎng)瓶37.510提升行動。06×106
250ml玻璃培養(yǎng)瓶7815能力建設。07×107
2500ml旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶700100~2502。0×108
b)培養(yǎng)操作有關(guān)的器皿:
○a貯液瓶:主要用于存放或配制各種培養(yǎng)用液體如培養(yǎng)液研究進展、血清及試劑等無障礙。貯液瓶分為各種不同規(guī)格連日來,如1000ml、500ml認為、250ml系統、100ml、50ml重要意義、5ml等交流等。
○b吸管:主要分為刻度吸管、無(wú)刻度吸管規劃√岣??潭任苤饕糜谖 ⑥D(zhuǎn)移液體進入當下,常用的有1ml紮實、2ml、5ml新體系、10ml等規(guī)格投入力度。無(wú)刻度吸管分為直頭吸管及彎頭吸管,除可以作吸取不難發現、轉(zhuǎn)移液體外法治力量,彎頭尖吸管還常用于吹打、混勻及傳代細(xì)胞分享。
○c加樣器(移液器):用于吸取、移動(dòng)液體或滴加樣本信息化〗涷灧窒??筛鶕?jù)需要調(diào)節(jié)量的大小,吸量準(zhǔn)確趨勢、方便有力扭轉。尤以微量加樣器,可保證實(shí)驗(yàn)樣品(或試劑)含量精確,重復(fù)性良好。目前一站式服務,可高溫消毒的廣度和深度,多通道的各類(lèi)移液器可供使用者選擇,能確保加樣準(zhǔn)確、快速引領作用、方便并且達(dá)到無(wú)菌要求.
c)其他用品:尚有收集細(xì)胞用的離心管加強宣傳,放置試劑或臨時(shí)插置吸管用的試管,裝放吸管以便消毒的玻璃或不銹鋼容器,用于存放小件培養(yǎng)物品便于高壓消毒的鋁制飯盒或貯槽,套于吸管頂部的橡膠吸頭用的舒心,封閉各種瓶技術發展、管的膠塞、蓋子集成、凍存細(xì)胞用的安瓿或凍存管重要手段、不同規(guī)格的注射器互動講、燒杯和量筒以及漏斗,超凈工作臺(tái)使用的酒精燈像一棵樹,供實(shí)驗(yàn)人員操作前清潔消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型噴壺等過程中。
(3)器械:主要用于解剖、取材能運用、剪切組織及操作時(shí)持取物件達到。常用的有:手術(shù)刀或解剖刀、手術(shù)剪或解剖剪(彎剪及直剪)工具,用于解剖動(dòng)物智慧與合力、分離及切剪組織,制備原代培養(yǎng)的材料;眼科虹膜小剪(彎剪或直剪)重要的角色,用于將組織材料剪成小塊;血管鉗及組織鑷開放要求、眼科鑷(彎、直)平臺建設,用于持取無(wú)菌物品(如小蓋玻片)夾持組織等服務機製;口腔科探針或代用品,用以放置原代培養(yǎng)之組織小塊。
2使用、特殊設(shè)備
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室除了應(yīng)配備上述的常用基本設(shè)備以外大幅拓展,如有條件,可添置一些特殊或*設(shè)備儀器,以便更有效、更精確足夠的實力、更深入地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室工作緊迫性。例如:
(1)酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀—-可用于進(jìn)行免疫學(xué)測(cè)定及細(xì)胞毒性更適合、藥物敏感性檢測(cè)等高效。
(2)超低溫冰箱(-85℃)——便于儲(chǔ)存某些試劑及標(biāo)本要素配置改革。
(3)旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)器——用于某些特殊細(xì)胞或需要收獲大量細(xì)胞的培養(yǎng)體系。
(4)熒光顯微鏡——進(jìn)行熒光染色樣本的觀察帶動產業發展。
∝熑窝u。?)流式細(xì)胞儀-—可更精確及快速檢測(cè)細(xì)胞。
”对鲂?。?)用于檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)條件的各種儀器,例如專(zhuān)門(mén)為快速分析細(xì)胞培養(yǎng)基中主要或關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分規則製定、代謝產(chǎn)物及氣體含量設(shè)計(jì)的多功能細(xì)胞培養(yǎng)分析儀、手提式CO2濃度測(cè)定儀等多樣性。