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ND2000超微量分光光度計(jì)的操作指南通常包括以下步驟

更新時(shí)間:2025-04-08瀏覽:170次

  ND2000超微量分光光度計(jì)是一種專為微量樣本設(shè)計(jì)的分光光度計(jì),可檢測(cè)低至1-2μL的核酸、蛋白質(zhì)等生物分子的濃度和純度雙向互動。其核心原理基于朗伯-比爾定律(A=εcl),通過(guò)測(cè)量特定波長(zhǎng)(如DNA 260 nm交流等、蛋白質(zhì)280 nm)的光吸收值,計(jì)算樣本濃度規劃。其主要由光源提高、單色器、樣品室進入當下、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成紮實。光源通常采用氘燈,它能發(fā)出連續(xù)的紫外光譜新體系。單色器(如光柵或棱鏡)用于從光源發(fā)出的廣譜光線中選擇出單一波長(zhǎng)的光投入力度。樣品室內(nèi)放置了微量樣品池,其路徑長(zhǎng)度通常在幾毫米到幾厘米之間不難發現,以適應(yīng)微量樣品的測(cè)量需求貢獻法治。檢測(cè)器則負(fù)責(zé)捕捉經(jīng)過(guò)樣品吸收后的光線強(qiáng)度,最后由數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行分析和計(jì)算分享。
  ND2000超微量分光光度計(jì)的操作指南通常包括以下步驟:
  1共享、儀器準(zhǔn)備
  接通電源與預(yù)熱:將超微量分光光度計(jì)的電源線插好信息化,打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)方式之一,等待儀器軟件初始化。不同型號(hào)的儀器預(yù)熱時(shí)間可能有所不同新型儲能,一般需要預(yù)熱15分鐘至30分鐘創新能力,使其溫度穩(wěn)定,確保儀器處于最佳工作狀態(tài)範圍。
  清潔樣品池:檢查樣品池是否干凈廣度和深度,如有污染或殘留液體,需用適當(dāng)?shù)娜軇ㄈ?0%乙醇)輕輕擦拭干凈引領作用,并用無(wú)塵紙擦干加強宣傳。注意避免刮傷樣品池表面。
  儀器校準(zhǔn):使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行儀器校準(zhǔn)用的舒心,校準(zhǔn)操作根據(jù)儀器型號(hào)可能有所差異技術發展,請(qǐng)參考儀器說(shuō)明書(shū)。這一步是為了確保測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
  2重要手段、設(shè)置測(cè)量參數(shù)
  選擇測(cè)量波長(zhǎng):根據(jù)待測(cè)物質(zhì)的特性和實(shí)驗(yàn)要求互動講,選擇合適的測(cè)量波長(zhǎng)。不同的物質(zhì)在特定波長(zhǎng)下有最大吸收峰像一棵樹,選擇該波長(zhǎng)可以獲得最佳的測(cè)量靈敏度和準(zhǔn)確性過程中。例如,對(duì)于DNA的測(cè)量能運用,通常選擇260nm和280nm的波長(zhǎng)達到。
  確定光程長(zhǎng)度:光程長(zhǎng)度是指光線通過(guò)樣品的距離,一般為1cm工具。但部分超微量分光光度計(jì)的光程較短智慧與合力,如0.5mm、1mm等重要的角色,具體需根據(jù)儀器型號(hào)和樣品特性來(lái)確定開放要求。
  設(shè)定測(cè)量模式:常見(jiàn)的測(cè)量模式有吸光度模式、濃度模式平臺建設、透過(guò)率模式等服務機製。吸光度模式用于直接測(cè)量樣品的吸光度值;濃度模式可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線自動(dòng)計(jì)算樣品的濃度使用;透過(guò)率模式則用于測(cè)量樣品的透光率大幅拓展。用戶需根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜆悠非闆r選擇合適的測(cè)量模式。
  3更加堅強、樣品測(cè)量
  空白對(duì)照調(diào)零:在進(jìn)行樣品測(cè)量之前與時俱進,通常需要進(jìn)行空白對(duì)照調(diào)零,以消除溶劑初步建立、比色皿等因素對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響綜合運用。取適量的空白溶劑(如蒸餾水、緩沖液等)要素配置改革,加到檢測(cè)基座上體系,放下樣品臂,浸泡一段時(shí)間(如2-3分鐘)帶動產業發展,然后用無(wú)塵紙將檢測(cè)基座擦拭干凈責任製。之后點(diǎn)擊調(diào)零按鈕,使儀器以空白溶劑為空白對(duì)照進(jìn)行調(diào)零倍增效應。
  加入樣品:將待測(cè)樣品用移液器吸取適量規則製定,加到檢測(cè)基座上。注意加樣時(shí)要緩慢優化服務策略、準(zhǔn)確關規定,避免產(chǎn)生氣泡或溢出新格局。對(duì)于一些需要稀釋的樣品,應(yīng)先進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屘幚戆踩?,使其濃度在儀器的線性范圍內(nèi)顯示。
  開(kāi)始測(cè)量:放下樣品臂,使樣品與檢測(cè)基座充分接觸真正做到。然后點(diǎn)擊測(cè)量按鈕科普活動,儀器將自動(dòng)記錄并顯示樣品的吸光度值、濃度或其他相關(guān)參數(shù)強化意識。測(cè)量完成后長期間,屏幕會(huì)顯示測(cè)量結(jié)果,包括吸光度現場、濃度高端化、A260/A280比值等信息。
  4我有所應、數(shù)據(jù)處理與記錄
  查看結(jié)果:測(cè)量完成后提單產,仔細(xì)查看儀器顯示的測(cè)量結(jié)果,確認(rèn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性至關重要。如果需要進(jìn)行多次測(cè)量發展空間,可以記錄每次的測(cè)量結(jié)果,并計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差有所應。
  保存數(shù)據(jù):將測(cè)量結(jié)果保存到計(jì)算機(jī)或打印機(jī)中足了準備,以便后續(xù)分析和處理≈μ嵘??梢允褂脙x器自帶的軟件或第三方軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析幅度。

 

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