羅氏熒光定量PCR儀LightCycler480詳細(xì)介紹

一品率、適用范圍：臨床/科研中利用熒光定量PCR方法檢測目標(biāo)基因，對其進(jìn)行定量或者定性分析或進(jìn)行基因分型或檢測突變不斷發展，為臨床治療進(jìn)行指導(dǎo)積極影響。
二、熒光定量PCR儀LightCycler 480 II性能總結(jié)
作為熒光定量技術(shù)的持有者集成，羅氏公司一直致力于為客戶提供性能優(yōu)秀的定量產(chǎn)品重要手段，羅氏LightCycler^® 480（以下簡稱LC-480）于2005年底面世，2006年開始在中國推廣穩定性，截至目前像一棵樹，已經(jīng)在中國各研究及機(jī)構(gòu)銷售達(dá)1000多臺(tái)，市場反應(yīng)熱烈去突破！
    LC-480是在總結(jié)了目前市場上現(xiàn)有熒光定量的特點(diǎn)后能運用，結(jié)合Roche自身的技術(shù)優(yōu)勢研發(fā)出來，在以下幾個(gè)方面體現(xiàn)了的技術(shù)特色：
1．反應(yīng)容器及檢測通量： 
    96孔智能設備，可選配升級為384孔反應(yīng)模塊不可缺少。用戶可自行更換，無需工程師到場特點。
 5色激發(fā)通道：290－800nm積極回應， 440重要性，465，498多種場景，533多元化服務體系，618nm； 6色熒光檢測通道： 488擴大公共數據，510深度，588，610核心技術體系，640開拓創新，660nm，適用多種熒光染料必然趨勢，開放性試劑主動性，客戶可根據(jù)實(shí)際情況選擇ROCHE或其他廠家提供的試劑。
2．反應(yīng)體積： 
96孔板： 10-100μl要素配置改革， 384孔板： 3-20μl體系，可節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本。
3．溫控系統(tǒng)（標(biāo)準(zhǔn)模式 ）：     
樣本升溫：4.8℃/秒帶動產業發展，連續(xù)可調(diào)
均一性： +/-0.1℃（是板式定量PCR中溫度均一性好的產(chǎn)品）
準(zhǔn)確性： +/-0.1℃
反應(yīng)時(shí)間：不借助快速試劑，96孔＜60min十分落實，384孔＜­­40min
4．光學(xué)系統(tǒng)： 
4/1）采用白色固態(tài)光源倍增效應，光強(qiáng)相對于氙燈更強(qiáng)，波長范圍為全波長製造業，適用多種熒光染料優化服務策略，開放性試劑，客戶可跟據(jù)實(shí)際情況選擇ROCHE或其他廠家提供的試劑發展基礎。
4/2）激發(fā)光經(jīng)五角反射鏡減少光程差兩個角度入手，消除光學(xué)邊緣效應(yīng)。
4/3）熱蓋的設(shè)計(jì)減少孔間光學(xué)信號交叉同期，鄰近孔之間大交叉干擾<0.02%生產效率。顏色補(bǔ)償軟件及濾光片減少同一孔內(nèi)的多種熒光染料的信號干擾，實(shí)現(xiàn)多重PCR方式效果。
5．線性范圍及檢測靈敏度：
定量動(dòng)態(tài)范圍可達(dá)10⁰－10¹⁰使用，樣品無需稀釋，達(dá)到單拷貝基因的水平密度增加。
6．精確性及重復(fù)性：
孔間檢測的重復(fù)性為CV≤0.15%有效性。可以區(qū)分1000與2000拷貝的差異機遇與挑戰，而且此項(xiàng)會(huì)作為裝機(jī)指標(biāo)廣泛關註！
7．檢測模式:
熒光染料（SYBR Green等）善於監督、Taqman 探針、分子信標(biāo)就能壓製、 Scorpion更合理，雜交探針、單探針等
8．軟件系統(tǒng)革新：
8/1）*的大二階導(dǎo)數(shù)法取Ct值效果。
8/2）考慮PCR實(shí)際擴(kuò)增效率有所應，而非武斷設(shè)定為2
8/3）含效率校正的相對定量軟件
8/4）高分辨率熔解曲線分析進(jìn)行基因掃描等

 羅氏熒光定量PCR儀LightCycler480詳細(xì)介紹 特色功能：

1.HRM分析功能：
高分辨率熔解曲線 （High Resolution Melting, HRM）可以從更細(xì)致的程度研究雙鏈DNA的熱變性過程，從而獲取更多的信息量預期。HRM做為一種創(chuàng)新敢於監督、均一、PCR擴(kuò)增反應(yīng)后進(jìn)行的分析方法結構，可應(yīng)用于對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中SNP重要的作用，基因突變和甲基化等基因變異檢測等廣泛的研究分析領(lǐng)域,如對食品中病源微生物的快速篩查與檢測等。
  憑借LightCycler® 480II系統(tǒng)*的基因掃描軟件和配套提供的高分辨率熔解曲線PCR反應(yīng)即用型體系HRM PCR Master規模最大，羅氏診斷應(yīng)用科學(xué)部*提供了基于模塊式定量PCR儀上的整合式基因掃描方案穩中求進。
2. Universal Probe Library通用探針庫（＞5000000轉(zhuǎn)錄組）
只需要165個(gè)預(yù)制探針就完成上百萬種實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)，對整個(gè)轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行高效研究最深厚的底氣。整套探針易于冰箱存儲(chǔ)協同控製，讓您的實(shí)時(shí)定量PCR檢測可靈活自在地進(jìn)行。
UPL的165個(gè)探針選自轉(zhuǎn)錄組中高頻率出現(xiàn)的8-和9-堿基序列品質，確崩煤?？梢愿采w任意的一個(gè)轉(zhuǎn)錄組的全部轉(zhuǎn)錄子。
UPL探針僅8到9個(gè)核苷酸長解決問題，且含有Locked Nucleic Acids(LNA)系列。LNA是一類核糖2、4位羥基縮合形成氧橋的核酸類似物相互配合，這一特殊構(gòu)像的核糖能夠促進(jìn)堿基堆積及核糖預(yù)組織效應(yīng)從而提高其熱穩(wěn)定性慢體驗，使僅不到10個(gè)核苷酸長度的探針Tm值有顯著的提高，方便進(jìn)行水解探針法的定量檢測智能化。并且科技實力，含有LNA的UPL探針能夠辨別其他核酸探針無法區(qū)分的單堿基錯(cuò)配，從而輕松保證您基因表達(dá)檢測的專一性要求合作。
3. RealTime ready 預(yù)制檢測板
這一系列的預(yù)制探針組合是用于多種qPCR檢測的即用預(yù)制微孔板勃勃生機，可直接用于檢測大量特定信號通路、代謝途徑或特定功能相關(guān)的基因表達(dá)情況極致用戶體驗。為方便使用提供有力支撐，已預(yù)裝于LightCycler® 96-/384-孔板中，每一平板都含有目標(biāo)特異的引物以及Universal Probe Library探針。您所需添加的只有預(yù)混酶液品率、水以及樣本cDNA相貫通，就可以獲得類似于微流體芯片的分析功能，整個(gè)過程更加直觀積極影響、簡便自動化方案。如果您有已知需要檢測的基因，羅氏還支持為您在線定制專屬的預(yù)制檢測板工藝技術，大化地節(jié)省您寶貴的時(shí)間效率。
除了信號通路、代謝途徑或特定功能相關(guān)的目標(biāo)基因近年來，每一預(yù)制平板上也包含了逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物特異的對照以及內(nèi)參基因用于簡化分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)講道理。